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α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒(速率微板法)注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2019-07-17   點(diǎn)擊次數(shù):1413次

α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒(速率微板法)注意事項(xiàng):

1,底物請避光保存。

2,嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

3,所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

4,本試劑不同批號組分不得混用。

5,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

α-羥丁酸脫氫酶(α-HBD)檢測試劑盒(速率微板法)操作步驟:

1, 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2 孔、陽性對照2 孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)。

2,加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3,溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4,配液:將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。

5,洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6,加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7,顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘。

8,終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

9,測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

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