怎么區(qū)分ELISA試劑盒能否測(cè)手中的樣本
現(xiàn)在ELISA試劑盒查看的樣本中,除了細(xì)胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。關(guān)于ELISA試劑盒客戶(hù)來(lái)說(shuō),在試驗(yàn)中或許用到不一樣的樣本,怎么區(qū)分所購(gòu)的ELISA試劑盒能否測(cè)手中的樣本呢?
關(guān)于zui常見(jiàn)的細(xì)胞上清,咱們都知道,培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)程中,無(wú)分外狀況一般是10%的牛血清參與培養(yǎng)基中,經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后,細(xì)胞的吸收耗費(fèi),zui后細(xì)胞上清中蛋白含量會(huì)很少,并且關(guān)于一般牛血清出產(chǎn)的來(lái)說(shuō),在出產(chǎn)進(jìn)程中現(xiàn)已去除了,所以對(duì)一般ELISA而言,不會(huì)影響抗體抗原的。
如elisa試劑盒沒(méi)有供應(yīng)專(zhuān)門(mén)用于血清血漿樣本的緩沖液,那么只要用已知濃度的待測(cè)政策蛋白參與所測(cè)種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測(cè)政策蛋白參與PBS緩沖液中一起查看對(duì)比,ELISA試劑盒即可知道該試劑盒是不是能夠直接用來(lái)測(cè)血清血漿樣本。
ELISA試劑盒靈敏度高是一大優(yōu)點(diǎn),而這其實(shí)也是和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說(shuō)來(lái),如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問(wèn)題。
一般來(lái)說(shuō),試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫(xiě)的靈敏度。
一般說(shuō)來(lái),診斷試劑的檢測(cè)范圍以ng/ml計(jì)。而常見(jiàn)的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白,范圍可隨樣本的類(lèi)型而變化。所以實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過(guò)文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法確定樣本是否在所購(gòu)的范圍內(nèi),是很重要的步驟。