簡要描述:
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
更新時間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:919
商品詳情:
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒測定意義:
β-1,3-GA( EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷鍵水解。在植物染病或處于其他逆境條件下,可誘導(dǎo)細(xì)胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性測定廣泛應(yīng)用于植物病理和逆境生理研究。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3241 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3241-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,內(nèi)切β-1,3-葡萄糖苷鍵,產(chǎn)生還原末端,通過測定還原糖生成速率來計(jì)算其酶活性。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
CD134分子ELISA試劑盒 CD134免費(fèi)代測試劑
CD10分子ELISA試劑盒 CD10免費(fèi)代測試劑
CC趨化因子受體7ELISA試劑盒 CCR7免費(fèi)代測試劑
CC趨化因子受體5ELISA試劑盒 CCR5免費(fèi)代測試劑
CC趨化因子受體1ELISA試劑盒 CCR1免費(fèi)代測試劑
CC趨化因子7ELISA試劑盒 CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7免費(fèi)代測試劑
CC趨化因子5ELISA試劑盒 CCL5/D17S136E/SCYA5免費(fèi)代測試劑
CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白εELISA試劑盒 C/EBPε免費(fèi)代測試劑
CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δELISA試劑盒 C/EBPδ免費(fèi)代測試劑
cAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循環(huán)磷二酯酶10AELISA試劑盒 PDE10A免費(fèi)代測試劑
Ca2+激活K+通道蛋白2ELISA試劑盒 KCNN2免費(fèi)代測試劑
C4結(jié)合蛋白ELISA試劑盒 C4BP免費(fèi)代測試劑
C1q/TNF相關(guān)蛋白3ELISA試劑盒 Cartonectin/CTRP3/CORS-26免費(fèi)代測試劑
B細(xì)胞受體相關(guān)蛋白31ELISA試劑盒 BCAP31免費(fèi)代測試劑
B細(xì)胞受體ELISA試劑盒 BCR免費(fèi)代測試劑
β1,3葡聚糖酶(β1,3GA)測試盒過氧化氫(H2O2)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
過氧化氫(H2O2)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)比色法檢測試劑盒熒光法100管/96樣
脂質(zhì)過氧化物(LPO)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
脂質(zhì)過氧化物(LPO)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
丙二醛(MDA)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
丙二醛(MDA)比色法檢測試劑盒 可見分光光度法 50管/48樣
氧化酶(XOD)比色法檢測試劑盒 微量法100管/96樣
氧化酶(XOD)比色法檢測試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣